細胞培養過程中遇到的常見問題及解決的辦法:
1.培養液pH值變化太快:
(1)CO2張力不對;培養瓶蓋擰得太緊;NaHCO3緩沖系統緩沖力不足;培養液中鹽濃度不正確。細菌、酵母或真菌污染。按培養液中NaHCO3濃度增加或減少培養箱內CO2濃度,
2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。
(2)改用不依賴CO2培養液。松開瓶蓋1/4圈。加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度。在CO2培養環境中改用基于Earle’s鹽配制的培養液,在大氣培養環境中培養
改用Hank’s鹽配制的培養液。丟棄培養物或用抗生素除菌。
2. 培養液出現沉淀,但pH值不變:
用洗滌劑清洗后殘留磷酸鹽將培養基成分沉淀下來。冰凍保存培養液。
用去離子水反復沖洗玻璃器皿,然后除菌。
將培養液加熱到37℃,搖動使其溶解如沉淀仍然存在,丟棄培養液。
3. 培養液出現沉淀,同時pH 發生變化:
細菌或真菌污染 // 丟棄培養物或用抗生素除菌。